Você está enfrentando problemas com o formato e a polarização de suas células, ou com a organização do citoesqueleto, motilidade celular, proliferação, sobrevivência e diferenciação celular? Talvez a causa seja a adesão celular.

A boa notícia que eu trago é que isso é fácil de resolver. Basta utilizar frascos, microplacas, placas de qualidade. Talvez o problema não está nas suas células, mas sim na qualidade do material que você está utilizando.

Isso ocorre porque a maioria das células não prolifera ou sobrevive caso não esteja bem aderida a um substrato, o que é chamado de dependência de ancoragem.

Os fatores de crescimento solúveis (EGF, FGF, PDGF, etc.) não são suficientes para induzir a proliferação, pois as células precisam da sinalização das integrinas de membrana. Existe uma cooperação entre as integrinas e os receptores de crescimento; eles fazem parte de um sistema integrado que fornece sinais bioquímicos para diversas funções, como proliferação celular, expressão gênica, diferenciação, apoptose e migração.

Em um plástico com bom tratamento, como os da TPP, quando as integrinas se ligam à superfície de forma adequada e homogênea (ou seja, a célula possui grande superfície de contato com o plástico), a estrutura dos filamentos de actina se reorganiza, formando uma força de tração. Isso recruta proteínas quinases (como a FAK - Focal Adhesion Kinase), que autofosforila proteínas de sinalização intracelular. A ativação da FAK leva à ativação de várias cascatas de sinalização, como a via da proteína MAPK, essencial na proliferação celular, culminando na ativação de fatores de transcrição no núcleo para a proliferação celular.

Por isso, escolher o material adequado para o cultivo de células é o primeiro passo. Um material de boa qualidade permitirá que a célula faça uma adesão ativa e se espalhe no recipiente, gerando uma grande área de contato. Isso promove a reorganização celular e a ativação de proteínas de adesão, como as integrinas e a FAK, desencadeando uma cascata de vias intracelulares que regulam a proliferação, a expressão gênica, entre outras funções. Se a célula não se aderir corretamente ou de maneira uniforme, a cultura não crescerá uniformemente, ou seja, não será uma população homogênea. Além disso, poucas células apresentarão a resposta esperada aos estímulos fornecidos. Talvez seja por isso que suas células não estão indo na direção desejada. Alguns estudos sugerem que o mau funcionamento da adesão e, consequentemente, dos estímulos mecânicos pode gerar uma expressão defeituosa e contrária da célula. Isso é o que ocorre no desenvolvimento de doenças nos tecidos, como câncer e distrofias.

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Referências : CAI, Shuxiang; WU, Chuanxiang; YANG, Wenguang; LIANG, Wenfeng; YU, Haibo; ZHANG, Lianqing. Recent advance in surface modification for regulating cell adhesion and behaviors. Nanotechnology Reviews, [s.l.], v. 9, n. 1, p. 971-989, 2020. DOI: 10.1515/ntrev-2020-0076.

SHINDE, Ashwini S.; ILLATH, Kavitha; GUPTA, Pallavi; SHINDE, Pallavi; LIM, Ki-Taek; NAGAI, Moeto; SANTRA, Tuhin Subhra. A review of single-cell adhesion force kinetics and applications. Cells, [s.l.], v. 10, n. 3, p. 577, 2021. DOI: 10.3390/cells10030577.